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簡(jiǎn)單介紹層析冷柜采用的層析技術(shù)和使用原理

發(fā)布時(shí)間:2021-11-15 13:42:06瀏覽:954次

  層析技術(shù)是近代生物化學(xué)常用的分離技術(shù)之一。它是利用混合物中各組分的理化性質(zhì)(吸附力、分子形狀和大小、分子極性、分子親和力、分配系數等)的差異,在兩相運動(dòng)中,不斷地進(jìn)行交換、分配、吸附及解吸附等過(guò)程,可將各組分間的微小差異經(jīng)過(guò)相同的重復過(guò)程而達到分離。配合相應的光學(xué)、電學(xué)和電化學(xué)檢測手段,可用于定性、定量和純化某種物質(zhì),其純度高達99%。層析法的特點(diǎn)是分離率、靈敏度(pg-fg級)、選擇性均高的一種分離方法。尤其適合樣品含量少,而雜質(zhì)含量多的復雜生物樣品的分析。
  
  層析冷柜就是采用這種技術(shù),專(zhuān)為生化層析實(shí)驗而研制的特殊用途冷柜,主要用在生命科學(xué)研究的高校學(xué)科和科研院所,主要用來(lái)進(jìn)行各種酶類(lèi),肽類(lèi),大分子,核酸等物質(zhì)的生化層析分析試驗。也可用于其他需要低溫環(huán)境的實(shí)驗,或用于物品冷藏。層析冷柜專(zhuān)門(mén)為對溫度要求很高的各種應用設計,可以在箱內操作層析設備和其它簡(jiǎn)易安裝的儀器和設備。
  
  使用原理如下:
  生物分子間存在很多特異性的相互作用,它們之間都能夠專(zhuān)一而可逆的結合,這種結合力就稱(chēng)為親和力。親和層析就是通過(guò)將具有親和力的兩個(gè)分子中一個(gè)固定在不溶性基質(zhì)上,利用分子間親和力的特異性和可逆性,對另一個(gè)分子進(jìn)行分離純化。被固定在基質(zhì)上的分子稱(chēng)為配體,配體和基質(zhì)是共價(jià)結合的,構成親和層析的固定相,稱(chēng)為親和吸附劑。
  
  親和層析時(shí)先選擇與待分離的生物大分子有親和力物質(zhì)作為配體,并將配體共價(jià)結合在適當的不溶性基質(zhì)上。將制備的親和吸附劑裝柱平衡,當樣品溶液通過(guò)親和層析柱的時(shí)候,待分離的生物分子就與配體發(fā)生特異性的結合,從而留在固定相上;而其它雜質(zhì)不能與配體結合,仍在流動(dòng)相中,并隨洗脫液流出,這樣層析柱中就只有待分離的生物分子。通過(guò)適當的洗脫液將其從配體上洗脫下來(lái),就得到了純化的待分離物質(zhì)。
 

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